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內臟利什曼病(VL)是一種死亡率很高的惡性疾病,主要由杜氏利什曼原蟲引起。白蛉是VL傳播的主要媒介,而狗是白蛉的主要攜帶者。VL是許多國家的一種地方性疾病,在大多發展中國家中,VL也是一個嚴重的問題,特別在那些人口集中的城市里。這種疾病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國都有很高的發病率。VL也會傳播到靠近地中海的一些國家去,如意大利、法國南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在歐洲南部,VL已成為AIDS病人中主要的機會性傳染病。急性VL的診斷通常是通過抽吸骨髓來直接鑒別其寄生蟲。這種鑒定方法對人體有侵襲性,疼痛并且危險,而且經常因不能從組織中分離到寄生蟲而使得鑒定的成功率非常小。另外 ELISA試劑盒,在急性疾病階段,抗利什曼原蟲抗體的滴度非常高,血清篩查的方法已廣泛被應用。ELISA應當是VL血清學診斷的實驗方法,盡管免疫熒光抗體檢測和直接凝集實驗檢測的是整個寄生蟲,但它們仍然被廣泛應用(ELISA一起用或單獨用)。
3、 ELISA試劑盒實驗原理
在*次溫育時,病人血清中的抗體結合到檢測孔的抗原上。在第二次溫育時,酶復合物可結合到抗原抗體復合物上。洗板除去未結合的酶聯物,加入顯色劑,有酶聯物和過氧化物酶的情況下會顯示藍色。之后加入終止液終止酶反應,此時溶液由藍色變成。
收集樣品后盡快檢測. 如需保存, 凍存樣品,但要避免反復凍融.檢測前,將樣品解凍至室溫.
如樣品需稀釋,用EIA緩沖液稀釋
建議樣品,標準品做雙份檢測
保持樣品處于中性PH范圍.有機溶劑的污染會影響實驗結果
ELISA試劑盒只能用本試劑盒提供的洗滌液洗板.不充足的洗板會導致錯誤的結果
在吸水紙上拍干去除殘留液滴時,切勿用吸水紙刮擦孔內壁
顯示劑應避光保存并避免與金屬物質接觸
加終止液后,30 min內就應讀取實驗結果